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當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  PCR試劑盒  >  PCR檢測試劑盒  >  50次短螺旋體通用PCR檢測試劑盒規(guī)格

短螺旋體通用PCR檢測試劑盒規(guī)格

簡要描述:短螺旋體通用PCR檢測試劑盒規(guī)格上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:大鼠腸微血管細胞*培養(yǎng)基100mL

牛舌菌、肝色牛排菌 Fistulina hepatica釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

脫脂奶粉/無脂肪奶粉/Nonfat-Dried Milk蛋白組級250克國產(chǎn)/進口

嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearoth

  • 產(chǎn)品型號:50次
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-16
  • 訪  問  量:357

詳細介紹

技術(shù)原理:
 DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。

注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

 短螺旋體通用PCR檢測試劑盒規(guī)格

 Brachyspira spp.PCR

BK-P8927

原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
?
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

肌球蛋白輕鏈2(MYL2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Myosin Light Chain 2, Regulatory, Cardiac (MYL2)

改良番茄汁培養(yǎng)基/改良番茄汁瓊脂/Tomato Juice Agar Modified食品中酸菌總數(shù)測定250克國產(chǎn)/進口

大家鼠肺成纖維樣細胞英文名稱:NRL1

HFF-1(人包成纖維細胞)5×106cells/瓶×2

刺孢吸水鏈霉菌 Streptomyces hygrospinosus佛羅里達側(cè)耳 Pleurotus florida

雪白霉 Rhizopus niveus熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

大鼠腸微血管細胞*培養(yǎng)基100mL

牛舌菌、肝色牛排菌 Fistulina hepatica釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

脫脂奶粉/無脂肪奶粉/Nonfat-Dried Milk蛋白組級250克國產(chǎn)/進口

嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilusHK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞

少霉 Rhizopus arrhizus異常漢遜酵母 Hansenula anomala

短螺旋體通用PCR檢測試劑盒規(guī)格解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

MA-782(小鼠腺細胞)5×106cells/瓶×2

泡盛曲霉 Aspergillus awamori

浸麻類芽胞桿菌 Paenibacillus macerans

HCT-8(人盲腸腺細胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

海棗曲霉 Aspergillus phoenicis

大鼠腦膜細胞*培養(yǎng)基100mL

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis

嗜熱側(cè)孢霉

小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)

lovo, 人結(jié)腸細胞

噬尼古丁節(jié)桿菌 Arthrobacter nicotinovorans

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

SK-N-SH(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2

 

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