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當前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  PCR試劑盒  >  PCR檢測試劑盒  >  50次異尖線蟲屬PCR檢測試劑盒說明書

異尖線蟲屬PCR檢測試劑盒說明書

簡要描述:異尖線蟲屬PCR檢測試劑盒說明書上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:* CAS 14638-18-7 * 規(guī)格: 200mg

蒲公英 CAS * 規(guī)格: 0.5g

甘草苷 CAS 551-15-5 * 規(guī)格: 20mg

熊果酸 CAS 77-52-1 * 規(guī)格: 20mg

  • 產(chǎn)品型號:50次
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-16
  • 訪  問  量:346

詳細介紹

注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

 異尖線蟲屬PCR檢測試劑盒說明書

 Anisakis spp.PCR

BK-P8792

原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
?
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

莪術(shù)醇 CAS  *  規(guī)格: 100mg

* CAS 58-38-8 *  規(guī)格: 100mg

生長激素 CAS  *  規(guī)格: 0.61ug

人瘤病L1基因分型參考品 CAS  *  規(guī)格: 100ul/管,30管/套

蓽茇 CAS  *  規(guī)格: 1g

* CAS 1229-29-4 *  規(guī)格: 100mg

阿莫林 CAS 26787-78-0 *  規(guī)格: 100mg

維生素E CAS 14638-18-7 *  規(guī)格: 200mg

蒲公英 CAS  *  規(guī)格: 0.5g

甘草苷 CAS 551-15-5 *  規(guī)格: 20mg

熊果酸 CAS 77-52-1 *  規(guī)格: 20mg

藁本內(nèi)酯 CAS  *  規(guī)格: 約0.1mL

四環(huán)素 CAS  *  規(guī)格: 200mg

* CAS 20977-05-3 *  規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

白樺脂醛 CAS 13159-28-9 *  規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

異尖線蟲屬PCR檢測試劑盒說明書2-溴-5-吡  173.01  2- -5- amino pyridine*:13534-97-9分子量: C5H5BrN2

對氯  238.45  The chlorine iodobenzene*:637-87-6分子量: C6H4ClI

4-叔丁鄰二甲腈  184.24  4- tert butyl phthalate two*:32703-80-3分子量: C12H12N2

溶劑橙2  Solvent Orange 2  262.31分子量: C17H14N2O*:2646-17-5

磺阿曲庫銨  Benzene sulfonic acid  1243.48分子量: C65H82N2O18S2*:64228-81-5

草查爾酮A  Grass chalcone A  338.39698分子量:C21H22O4*:58749-22-7

間氧甲  184.23  Benzene oxygen group*:3586-14-9分子量: C13H12O

*  Gourd  分子量:*:7257-29-6

4'-溴-α,α,α''-三吡  312.17  4'- bromo alpha, alpha, alpha three''- pyridine*:149817-62-9分子量: C15H10BrN3

8-甲氧-2-甲喹啉  173.22  8- methyl group -2-*:3033-80-5分子量: C11H11NO

9-(4-乙炔)咔唑  267.33  9- (4- phenyl acetylene) carbazole*:262861-81-4分子量: C20H13N

技術(shù)原理:
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。

 

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