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磷脂酶D(PLD)測試盒可見分光光度法

簡要描述:磷脂酶D(PLD)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:肉湯培養(yǎng)基D 英文名稱:Broth medium D (Lactose monohydrate broth) 產(chǎn)品規(guī)格:250g 增菌肉湯培養(yǎng)基E 英文名稱:Enrichmentbroth medium E 產(chǎn)品規(guī)格:250g 瓊脂培養(yǎng)基F 英文名稱:Agar medium F 產(chǎn)品規(guī)格:250g 肉湯培養(yǎng)基G 英文名稱:Broth med

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-26
  • 訪  問  量:658

詳細(xì)介紹

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:磷脂酶D(PLD)測試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

檢測方法:可見分光光度法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6656

產(chǎn)品分類:脂肪酸代謝系列
商品介紹:

測定意義:

磷脂酶DEC3.1.4.4)即磷脂酰水解酶,是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應(yīng)的一類酶的總稱,廣泛存在于高等動植物和細(xì)菌等多種生物體中,具有參與細(xì)胞脂質(zhì)代謝、信號傳導(dǎo)、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。

測定原理

磷脂酶D催化水解磷脂酰末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和,在氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過氧化氫,過氧化氫在過氧化氫酶的作用下將4-氨基和重蒸酚氧化成粉紅色物質(zhì),在500nm處有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、超速冷凍離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋,無水乙醇。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

50次 植物RNAout Plant RNAOUT 4℃保存

2 ug pCEP4 pCEP4 低溫運輸,-20℃保存

馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂 Potato Dextrose Semisolid Agar 250g

500mg 硝苯吡啶 Nifedipine 4℃保存

50T 禽呼腸孤病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

10 mg Hydroxystilbamidine  Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

250mL BSA Blocking Buffer in TBS  BSA Blocking Buffer in TBS  常溫保存

3g DNA UV防護劑 NDAUV Erasol 4℃保存

2 ug pGL4.10 pGL4.10 低溫運輸,-20℃保存

增菌肉湯培養(yǎng)基E Enrichmentbroth medium E 250g

1瓶 Hep-2[Hep2]細(xì)胞株 Hep-2[Hep2] 低溫運輸和保存

磷脂酶D(PLD)測試盒可見分光光度法EphB2 R  酪蛋白激受體B2抗體 規(guī)格: 0.1ml

IRX5  Iroquois同源蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-MYPT1/MBS(Ser507)  磷酸化肌球蛋酸抗體 規(guī)格: 0.1ml

Myoglobin  肌紅蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

CLPTM1  唇裂和腭裂相關(guān)跨膜蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

PJA2/RNF131  環(huán)指蛋白131抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rad52  Rad52抗體 規(guī)格: 0.1ml

H5N1 Hemagglutinin  A型毒H5N1凝集素 規(guī)格: 1ml

LBP1/Upstream Binding Protein 1  上游結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

ABCG1  三磷酸苷結(jié)合盒亞家族G1抗體 0.1ml

PCGF3/RNF3  環(huán)指蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

RABX5/Rabex5  G蛋白相關(guān)RABX5抗體 規(guī)格: 0.2ml 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

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