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磷酸丙糖異構酶(TPI)測試盒微量法

簡要描述:磷酸丙糖異構酶(TPI)測試盒微量法公司正在出售的產品:麥康凱瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:Maconkey Agar Medium 產品規(guī)格:250g 沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS) 英文名稱: 產品規(guī)格:250g 綠膿菌素測定用培養(yǎng)基(PDP) 英文名稱:Pseudomonas Agar P 產品規(guī)格:250g 哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱:Columbia Blood Agar M

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-27
  • 訪  問  量:639

詳細介紹

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

磷酸丙糖異構酶(TPI)測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6617

商品介紹:

測定意義:

磷酸丙糖異構酶是重要的糖酵解酶,廣泛存在于動植物及微生物體內,在機體內參與葡萄糖代謝,在糖酵解,糖異生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代謝中都發(fā)揮著重要作用。

測定原理

磷酸丙糖異構酶將磷酸二羥丙酮轉化為3-磷酸甘油醛,3-磷酸甘油醛與NAD3-磷酸甘油醛脫氫酶的作用下生成3-磷酸甘油酸和NADH,340nm處的吸光度變化反映了磷酸丙糖異構酶的活性的高低。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、研缽、紫外分光光度計、1 mL石英比色皿。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

氯、碘中和劑管  9ml*20

250mL 超敏化學發(fā)光(HRP)檢測試劑盒 Ultrasensitive ECL Kit 4℃保存

2 ug TetO-FUW-OSKM TetO-FUW-OSKM 低溫運輸,-20℃保存

500次 硅膠膜離心吸附柱再生液 Spin Column Recharger  常溫

2 ug pAc5.1B-EGFP pAc5.1B-EGFP 低溫運輸,-20℃保存

大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(TSA) Tryptose Soya Agar 1kg

1瓶 Bel-7404細胞株 Bel-7404 低溫運輸和保存

0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE)顆粒 Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 300ml/袋*10

100次 即用型EMSA試劑盒 EMSA Kit -20℃保存

250mL NP40 Permeating Solution in TBS,10X(NP40滲透液,10X) NP40 Permeating Solution in TBS,10X 常溫保存

0.1mL×10 Rosetta (DE3) 感受態(tài)細胞 Rosetta(DE3) Competent Cell -80℃保存

磷酸丙糖異構酶(TPI)測試盒微量法phospho-MEK1(Thr286)  磷酸化絲裂原活化蛋白激激1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Frizzled 7/FZE3  卷曲蛋白FZD7抗體 規(guī)格: 0.1ml

CD170/Siglec-5  唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-MEK5(Ser129)  磷酸化絲裂原活化蛋白激激5抗體 規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-human IgG/FITC  FITC標記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.3ml

phospho-GIT1(Ser375)  磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1 規(guī)格: 0.1ml

Thrombomodulin/CD141  栓調節(jié)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cytokeratin 5/CK5  細胞角蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1ml

ECE1  內皮素轉化1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Monkey IgM/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗猴IgM 規(guī)格: 0.1mlLMBR1/DIF14  分化相關基因14抗體 規(guī)格: 0.2ml

Unrip/STRAP  絲/蘇激受體相關蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-Bcl 10(Ser218)  磷酸化Bcl-10抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-MEF2A (Ser408)  磷酸化肌細胞增強因子2抗體 規(guī)格: 0.1mlMARCH4  膜相關環(huán)指蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

 

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