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總抗氧化能力(ABTS法)測試盒微量法

簡要描述:總抗氧化能力(ABTS法)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:疊氮鈉葡萄糖肉湯 英文名稱:Azide Dextrose Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 乙基紫疊氮鈉肉湯 英文名稱:Ethyl Violet Aziode Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g KF鏈球菌瓊脂 英文名稱:KF Streptococcus Agar 產(chǎn)品規(guī)格:100 萘啶酮酸 英文名稱:Nalidixic Acid 產(chǎn)品規(guī)格:1.

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-28
  • 訪  問  量:648

詳細介紹

商品介紹:

測定意義:

測定對象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

測定原理:

ABTS法是使用*泛的間接檢測方法,可用于親水性和親脂性物質(zhì)抗氧化能力測定。ABTS經(jīng)氧化后生成穩(wěn)定的藍綠色陽離子自由基 ABTS+,能溶于水相或酸性乙醇介質(zhì)中,在734nm處有最大吸收。被測物質(zhì)加入ABTS+溶液后,所含抗氧化成分能與ABTS+發(fā)生反應(yīng)而使反應(yīng)體系褪色。在734nm檢測吸光度的變化,并以Trolox作為對照體系量化抗氧化物質(zhì)的抗氧化能力。

自備實驗用品:

恒溫水浴鍋、低溫離心機、分光光度計、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

總抗氧化能力(ABTS法)測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6439

11.png 

實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

250mL Succinate Buffer(琥珀酸緩沖液),0.2M,pH6.0   Succinate Buffer,0.2M,pH6.0   常溫保存

1瓶 BHK-21 [C-13]細胞株 BHK-21 [C-13] 低溫運輸和保存

2 ug pSK1015 pSK1015 低溫運輸,-20℃保存

10mL RNA溶解液   常溫

2 ug pCMV-SPORT6 MAP3K5 pCMV-SPORT6 MAP3K5 低溫運輸,-20℃保存

FBP溶液 FBP Solution 1ml*5支

25mL 聚乙二醇溶液 Poly(Ethylene Glycol Solution) 4℃保存

50T 人亞甲基四氫還原基因C677T突變PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

1 g Hemoglobin(NO清除劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

100mL DIPSO Buffer,0.2M,pH7.4  DIPSO Buffer,0.2M,pH7.4  常溫保存

5g 固藍 BB 鹽 Fast Blue BB Salt    -20℃避光保存

總抗氧化能力(ABTS法)測試盒微量法phospho-MYL9(Thr19)  磷酸化肌球蛋白輕鏈9抗體 規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/HRP  辣根過氧化物標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

phospho-c-Jun(Thr239)  磷酸化原基因c-Jun抗體 規(guī)格: 0.1ml

MAP1B  微管相關(guān)蛋白1B抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-LATS1 (Thr1079)  磷酸化瘤抑制基因LATS1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Calcitonin  降鈣素抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgG/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

ADO  2-氨基乙硫醇雙加氧抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Biotin/PE  PE標記的兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.1ml

alpha 1 Spectrin/Spectrin α  影蛋白/收蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-Guinea pig IgG/APC  APC標記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

OAT-1/SLC22A6  陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體 規(guī)格: 0.1ml

 


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