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當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  基因檢測PCR試劑盒  >  熒光定量PCR  >  50次牛呼腸孤病毒染料法熒光定量RT-PCR 試劑盒

牛呼腸孤病毒染料法熒光定量RT-PCR 試劑盒

簡要描述:牛呼腸孤病毒染料法熒光定量RT-PCR 試劑盒及公司相關(guān)產(chǎn)品GBP1 Others Human 人 GBP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 增甘1(>97.0%(T))Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid)質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)
木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mLN-甲基亞氨二乙酸(>98.0%(GC)(T))N-Methyliminodia

  • 產(chǎn)品型號:50次
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2024-01-02
  • 訪  問  量:542

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品特點(diǎn):
高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品名稱:牛呼腸孤病毒染料法熒光定量RT-PCR 試劑盒 
產(chǎn)品規(guī)格: 50
產(chǎn)品貨號:BK-P97046
儲存條件:-20避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0E1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強(qiáng)
PCR
反應(yīng)的特異性決定因素為:
引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
堿基配對原則;
Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
靶基因的特異性與保守性。

產(chǎn)品特點(diǎn):
1.
使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2.
反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3.
抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan

TaqMan
探針的特性:
15′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC
23′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) Quencher, Q
3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, RQ分開,發(fā)熒光
4Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
兩相分離 1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
氧化鎳  Phenazine  分子式: C12H8N2     分子量:180.21

酚磺乙胺  Etamsylate  分子式:C6H6O5S.C4H11N        分子量:263.31

呋喃唑酮  Furazolidone  分子式:C8H7N3O5          分子量:225.16

氟化鎳四水(>98%,BR)  Nickel (II) fluoride tetrahydrate  分子式:NiF2      分子量:96.69

輔酶Q9;CoenzymeQ9  CoenzymeQ9
奎諾二甲基丙烯酸酯  (±)-6-Hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchromane-2-carboxylic acid  分子式C14H18O4  分子量250.29

喹乙醇;喹酰胺醇  Olaquindox  分子式:C12H13N3O4      分子量:263.25

來普霉素B 1%溶液  Leptomycin B 1% soluton  分子式:C33H48O6  分子量:540.73

雷氏曼著色劑  Leishman's stain  分子式:  分子量:

鄰苯二甲醛  o-Phthalaldehyde  分子式: C8H6O2     分子量:134.13
中性樹膠,英文名或英文縮寫:Neutral balsam,級別:BR,99.5%,規(guī)格:25  Humanadeno-associatedvirus,AAVELISA試劑盒人腺相關(guān)病毒(AAV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

592-84-7正丁酯Butyl formate  HumanAi-smoothmuscleaibody,ASMAELISAKit人抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

1,1,1-三扶-2,4-戊二酮,英文名或英文縮寫:TAA,級別:AR,97%,規(guī)格:25  人白介素11(IL-11)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

尼索地平 Nisoldipine (HPLC,98%) 63675-72-9 20MG 通用試劑  兔子可溶性粘附分子(Sam)免疫試劑盒 Rabbit soluble adhesion molecules,Sam ELISA Kit

α-溴丁醋酯 DL-qthyl 2-bromobutyrctq 233-68-6  神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(G4)ELISA試劑盒 ,英文名: G4 ELISA Kit
牛呼腸孤病毒染料法熒光定量RT-PCR 試劑盒胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂100  ELISAKitxR小鼠硫氧還蛋白還原酶規(guī)格:48T/96T

TTC 5g/10g/25g/100g原裝 Amresco 0765  HumanAi-myocardialaibody,AMAELISAKit人抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

寡霉素shēng huà shì jì容量:1公斤  人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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